93671 - Biologia Molecular Aplicada ao Diagnóstico e Prognóstico em Medicina Veterinária |
Período da turma: | 01/09/2021 a 28/02/2022
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Descrição: | Objetivos
A meta principal da disciplina é oferecer aos alunos os meios necessários para o entendimento de conceitos básicos e de técnicas de Biologia Molecular, visando capacitá-los a compreender as aplicações dessas técnicas no diagnóstico clínico através de uma ótica crítica e profissional. Essa meta será atingida pela instrução, exemplificação e discussão de conceitos fundamentais, buscando preparar o aluno para enfrentar e resolver problemas teóricos e/ou práticos, com o auxílio de bibliografia básica e instrumentação. Programa Resumido Conceitos básicos de biologia molecular relevantes às análises clínicas-laboratoriais. Técnicas de biologia molecular aplicadas ao diagnóstico clínico-laboratorial de doenças infecto-parasitárias, malignas e genéticas. Detecção de agentes patogênicos no ambiente e em alimentos. Testes de paternidade e forenses. Avaliação da combinação de tecidos para transplantes. Programa 1) CONCEITOS BÁSICOS DE BIOLOGIA MOLECULAR RELEVANTES ÀS ANÁLISES CLÍNICAS-LABORATORIAIS a) Aspectos gerais dos ácidos nucleicos e proteínas b) Obtenção de sondas moleculares e técnicas de hibridização c) Clonagem gênica: - estratégias de clonagem. - construção e análise de bibliotecas gênicas e de DNA. - caracterização de vetores de expressão e aplicações. d) Isolamento, purificação análise e sequenciamento de DNA - purificação e concentração de DNA a partir de soluções aquosas. - preparação de DNA genômico e de plasmídeos. - análise eletroforética de fragmentos e grandes moléculas de DNA ("Pulse-Field"). - clivagens enzimáticas e montagens de maoas de restrição - "southern bloting". - reações de hibridização com sondas de DNA e RNA radiomarcadas. - sequenciamento de DNA. e) Obtenção e análise de RNA: - preparação de RNA a partir de tecidos e células. - "northen bloting" - "slot bloting" f) Aplicações de técnicas de DNA recombinante para obtenção de produtos; métodos diagnósticos; vacinas, etc. g) Biotecnologia e suas aplicações em Análises Clínicas. h) Noções gerais sobre a reação de polimerização em cadeia "PCR": - amplificação enzimática de DNA por "PCR". - PCR quantitativo. - amplificação enzimática de RNA ("Reverse Transcriptase-PCR"). - PCR competitivo para detecção de RNA mensageiro. - amplificação de cDNA pelo método: "ligation-anchored PCR". - imuno-PCR. - análise de polimorfismo gênico por PCR. - organização laboratorial, equipamentos básicos e insumos necessários para aimplantação da técnica PCR. i) Noções gerais sobre a metodologia: "restriction Fragment Lenth Polymorphism"(RFLP) 2) TÉCNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR APLICADAS AO DIAGNÓSTICO CLÍNICO-LABORATORIAL DE DOENÇAS INFECTO-PARASITÁRIAS, MALÍGNAS E GENÉTICAS. 3) DETECÇÃO DE AGENTES PATOGÊNICOS NO AMBIENTE E EM ALIMENTOS 4) TESTES DE PATERNIDADE E FORÊNSICOS 5) AVALIAÇÃO DA COMBINAÇÃO DE TECIDOS PARA TRANSPLANTES: Bibliografia ALBERTS, B.; BRAY,D.; LEWIS,J.;RAFF,M.;ROBERTS,K.; WATSON,J.D. Molecular Biology of the Cell. Garland Publishing, Inc. NewYork, 2a. ed., 1989. COLIGAM, J. E. KRUISBEEK, A. M.; MARGULIES, D. H.; SHEVACH, E. M.; STROBER,W. Current Protocols in Immunology.Published by John Wiley & Sons, Inc. vols. 1 and 2, 1994. GRIFFIN, H.G.& GRIFFIN,A.M. PCR Technology Current Innovations. CRC Press, Inc., London, 1994. INNIS,M.A. GELFAND,D.H.; SNINSKY, J.J.; WHITE, T.J. PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications. Academic Press, Inc.Harcourt, Brace Javanowich Publishers, New York, 1990. KELLER, G.H. & MANAK,M.M. DNA probes. Macmillan Publishers Ktd. New York, 1989. LAMB,B.T. & GEARHART,J.D. YACs transgenic ans the study of genetics and human disease. Curr.Opin.Genet. Des. 5: 342-348,1995 LEHNINGER, A.L. Princípios de Bioquímica. Sarvier Editora de Livros Médicos Ltda. São Paulo; 1985 (Tradução do "Principles of Biochemistry"). Worth Publications, Inc. New York, 1982. LEVIN, B. Genes V. Oxford University Press, Oxford, New York, 1994. LODISH, H.; BALTIMORE, D.; BERK, A.; ZIPURSKY, S. L.; MATSUDAIRA, P.; DARNELL, J. Molecular Cell Biology. Scientific Americam Books, New York, 3a. ed., 1995. MONACO, A.P. & LARIN, Z. YACs,BACs, PACs ands MACs artificial chromosomes as research tools. Trends-Biotechnol. 12: 280-286, 1994. MULLIS, K.B. & FALOONA, F.A. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalyzed reaction. Methods Enzymol. 155: 335-50, 1987. SAMBROOK,J.; FRITSCH,E.F.; & MANIATIS, T. Molecular Cloning: A laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, vols. I,II and III, 1989. WATSON, J.D.; HOPKINS, N.H.; ROBERTS, J.W.; STEITZ, J.A. & WEINER,A.M. Molecular Biology of the Gene. The Benjamin Cunning Publishing Company, Inc. Menlo Park, CA - vol. I e II 4a. ed., 1987. WATSON, J.D.; GILMAM, M. WILKOWISK, J.; ZOLLER, M. Recombinant DNA.Scentific Americam Books, New York, 3a. ed.,1994. |
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Carga Horária: |
48 horas |
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Tipo: | Obrigatória | ||||
Vagas oferecidas: | 6 | ||||
Ministrantes: |
Heidge Fukumasu |
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