Apolo

Atividade

111509 - Técnicas e atividades para estudo da malária e COVID-19

Período da turma:

20/02/2023 a 20/02/2025

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Descrição:

1) Participação das reuniões de laboratório, bem como apresentação de artigos científicos previamente selecionados

2) Realização do Curso “Atualização em Animais de Laboratório” da Faculdade de Ciências Farmacêuticas e do Instituto de Química da Universidade de São Paulo.

3) Treinamento Prático em Camundongos:
Injeção IP e IV
Coleta de lavado bronco-alveolar e de líquido pleural
Coleta de sangue via intra-cardíaca, pelo plexo venoso e cauda
Coleta de pulmão para extração de RNA, proteínas e análise histopatológica

4) Coleta de parasitemia e contagem de eritrócitos infectados. Contagem manual de eritrócitos infectados em esfregaço sanguíneo e coloração de Giemsa; Contagem automatizada com marcador Draq5 e citometria de fluxo.

5) Realização da infecção de camundongos com eritrócitos infectados por Plasmodium berghei ANKA.
6) Utilização das câmaras plestimográficas; Calibração, medidas da função respiratória basal e uso do software Buxco.

7) Aplicação das técnicas do modelo preditivo, descrito por Ortolan, et al, 2016, para classificação da síndrome do desconforto respiratório agudo associada à malária na infecção experimental com camundongos DBA/2 .

8) Uso de softwares como Prisma, Mendley e MedCal.

9) Técnicas de cultivo de células imortalizadas.

10) Isolamento e sincronização de eritrócitos infectados.

11) Técnica de Western Blot

12) Técnica de PCR em tempo Real

Referências Bibliográficas

Malária
1. Aitken, EH; Negri, EM; Barboza, R; D'Império Lima, MR; Álvarez, JM; Marinho, CRF; Caldini, EG; EPIPHANIO, S. Ultrastructure of the lung in a murine model of malaria-associated acute lung injury/acute respiratory distress syndrome. Malaria Journal (Online), v. 13, p. 230, 2014.
2. EPIPHANIO, S; Campos, MG; Pamplona, A; Carapau, D; Pena, A; Ataíde, R; Monteiro, CAA; Félix, N; Costa-Silva, A; Marinho, CRF; Dias, S; Mota, MM. VEGF Promotes Malaria-associated acute lung injury in mice. Plos Pathogens, v.6, n.5, p. e1000916, 2010.
3. Nguee, SYT; Duarte-Júnior, JWB; EPIPHANIO, S; Rénia, L; Claser, C. Experimental Models to Study the Pathogenesis of Malaria-Associated Acute Respiratory Distress Syndrome. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, Volume 12 | Article 899581 doi: 10.3389/fcimb.2022.899581, 2022.
4. Ortolan, LS; Sercundes, MK; Barboza, R; Debone, D; Murillo, O; Hagen, SCF; Russo, M; D'Império Lima MR; Álvarez, JM; Amaku, M; Marinho, CRF; EPIPHANIO, S. Predictive criteria to study the pathogenesis of malaria-associated ALI/ARDS in mice. Mediators of Inflammation (Print), v. 2014, p. 1-12, 2014.
5. Ortolan, LS; Sercundes, MK; Moura, GC; Quirino, TC; Debone, D; Costa, DS; Murillo, O; Marinho, CRF; EPIPHANIO, S. Endothelial Protein C Receptor Could Contribute to Experimental Malaria-Associated Acute Respiratory Distress Syndrome, Journal of Immunology Research, Volume 2019, Article ID 3105817, 18 pages https://doi.org/10.1155/2019/3105817, 2019.
6. Pereira, MLM; Ortolan, LS; Sercundes, MK; Debone, D; Murillo, O; Lima, FA; Marinho, CRF; EPIPHANIO, S. Association of heme oxygenase 1 with lung protection in malaria-associated ALI/ARDS. Mediators of Inflammation, v.2016, p.1-12, doi 10.1155/2016/4158698, 2016.
7. Pereira, MLM; Marinho, CRF; EPIPHANIO, S. Could heme oxygenase-1 be a new target for malaria-associated acute lung injury/acute respiratory distress syndrome? doi: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, 10.3389/fcimb.2018.00161, vol. 8, p1-19, 2018.
8. Sercundes, MK; Ortolan, LS; Debone, D; Soeiro-Pereira, PV; Gomes, E; Aitken, EH; Russo, M; Condino-Neto, A; D'Império Lima, MR; Álvarez, JM; Portugal, S; Marinho, CRF; EPIPHANIO, S. Targeting neutrophils to prevent malaria-associated acute lung injury/acute respiratory distress syndrome in mice. Plos Pathogens, v. 12, n.12, p. 1-24, e1006054. doi:10.1371/journal.ppat.1006054, 2016. (Doc. 5.11.1.30)
9. Sercundes, MK; Ortolan, LS; Julio, VS; Bella, LM; Quirino, TC; Debone, D; Marcela S. Carneiro-Ramos, MS; Christoffolete, MA; Martins, JO; D’Império-Lima, MR; Alvarez, JM; Amarante-Mendes, GP; Gonçalves, LA; Marinho, CRF; EPIPHANIO, S. Blockade of caspase cascade overcomes malaria-associated acute respiratory distress syndrome in mice. Cell Death & Disease, 13(2):144. Pag 1-10. doi: 10.1038/s41419-022-04582-6, 2022.

COVID-19
10. Brooks SD, Smith RL, Moreira AS, Ackerman HC. Oral Lisinopril Raises Tissue Levels of ECA-2, the SARS-CoV-2 Receptor, in Healthy Male and Female Mice. Frontiers in Pharmacology doi: 10.3389/fphar.2022.798349
11. Deshmukh V, Motwani R, Kumar A, et al Histopathological observations in COVID-19: a systematic review Journal of Clinical Pathology 2021;74:76-83.
12. Feng G, et al. COVID-19 e disfunção hepática: insights atuais e estratégias terapêuticas emergentes. J Clin Transl Hepatol. 28 de março de 2020;8(1):18-24. doi: 10.14218/JCTH.2020.00018.
13. Li, Y. C. et al. The neuroinvasive potential of SARS-CoV-2 may be at least partially responsible for the respiratory failure of COVID-19 patients. J. Med. Virol. 2020, Feb. 27. doi: 10.1002/jmv.25728
14. Moreau GB, Burgess SL, Sturek JM, Donlan AN, Petri WA, Mann BJ. Evaluation of K18-hECA-2 Mice as a Model of SARS-CoV-2 Infection. Am J Trop Med Hyg. 2020 Sep;103(3):1215-1219. doi: 10.4269/ajtmh.20-0762. PMID: 32723427; PMCID: PMC7470527.
15. Patel, A. B. &; Verma, A. COVID-19 and Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitors and Angiotensin Receptor Blockers: What Is the Evidence? JAMA (2020) doi:10.1001/jama.2020.4812.
16. Peiris S, Mesa H, Aysola A, Manivel J, Toledo J, Borges-Sa M, Aldighieri S, Reveiz L. Pathological findings in organs and tissues of patients with COVID-19: A systematic review. PLoS One. 2021 Apr 28;16(4):e0250708. doi: 10.1371/journal.pone.0250708.
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18. Yinda CK, Port JR, Bushmaker T, Offei Owusu I, Purushotham JN, et al. (2021) K18-hECA-2 mice develop respiratory disease resembling severe COVID-19. PLOS Pathogens 17(1): e1009195. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1009195

Carga Horária:

325 horas

Tipo:

Obrigatória

Vagas oferecidas:

Ministrantes:

Sabrina Epiphanio

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