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Atividade
| 107928 - Aspectos moleculares e biológicos da GlicoImunologia |
| Período da turma: | 15/08/2022 a 15/02/2023
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| Descrição: | As atividades previstas para este curso envolvem a execução de etapas experimentais da tecnologia de “Phage Display” na busca por anticorpos recombinantescontra um potencial alvo molecular para o diagnóstico de Doença de Chagas, a transialidase de Trypanosoma cruzi(TS-cruzi).
Metodologia: O procedimento experimental será composto pelas seguintes etapas: 1)Produção e caracterização de forma recombinante da TS-cruzi (expressão e purificação da TS-cruzi); 2) Preparo do fago “Helper”; 3) Preparo de células eletrocompetentes; 4) Panning - Seleção da biblioteca por anticorpos recombinantescontraTS-cruzi;5) Titulação input e output; 6) Reamplificação da biblioteca de anticorpos apresentada em fagos; 7) Preparo do DNA para sequenciamento; 8) Sequenciamento de nova geração (NGS – Next GenerationSequencing); 9) Análise do sequenciamento e seleção das cadeias leves e pesadas. Referências ALBERTS, B. et al. Biologia Molecular da Célula. 5. ed. Porto Alegre: Artmed, 2010. BARBAS, C. F. et al. Phage Display: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor, 2001. BEHJATI, S. and TARPEY, P. S. What is next generation sequencing? Archives of Disease in Childhood - Education and Practice, v. 98, n. 6, p. 236–238, 2013. ILLUMINA. An Introduction to Next-Generation Sequencing TechnologyIllumina.com. [s.l: s.n.]. INCA. Incidência de câncer no Brasil. Disponível em: MAGALHÃES, L. DA S. et al. Phage Dipslay: Aspectos básicos e perspectivas atuais. In: RESENDE, R. R. (Ed.). Biotecnologia Aplicada à Saúde. São Paulo: Blucher, 2015. MARANHÃO, A. Q. et al. CLONAGEM E EXPRESSÃO DE GENES DE ANTICORPOS: MÉTODOS E APLICAÇÕES. In: RESENDE, R. R. (Ed.). Biotecnologia Aplicada à Saúde. São Paulo: Blucher, 2015. MARANHÃO, A. Q. Transformação bacteriana. In: AZEVEDO, M. DE O. et al. (Eds.). Técnicas básicas em biologia molecular. Brasília: Editora UnB, 2003. SAMBROOK, J.; RUSSEL, D. W. Molecular Cloning, A Laboratory Manual. 3. ed. New York: Cold Spring Harbor Labratory Press, 2001. |
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| Carga Horária: |
517 horas |
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| Tipo: | Obrigatória | ||||
| Vagas oferecidas: | 1 | ||||
| Ministrantes: |
Marcelo Dias Baruffi |
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